一、原位雜交儀應用 ①細胞特(te)異(yi)性mRNA轉錄的(de)定位,可用于(yu)基因(yin)圖譜,基因(yin)表達(da)和基因(yin)組進化的(de)研究;②感染組織中病毒(du)DNA/RNA的(de)檢(jian)測和(he)定位,如(ru)EB病毒(du)mRNA、人類乳頭狀瘤病毒(du)和(he)巨細胞病毒(du)DNA的(de)檢(jian)測;
③癌(ai)基(ji)因(yin)、抑癌(ai)基(ji)因(yin)及各(ge)種功能基(ji)因(yin)在轉錄水(shui)平的表達及其變化的檢測;
④基因(yin)在(zai)染(ran)色體上(shang)的定位;
⑤檢(jian)測染(ran)色(se)體的(de)變化(hua),如染(ran)色(se)體數量異常和染(ran)色(se)體易位等;
⑥分(fen)裂間期(qi)細胞遺傳(chuan)學的研究,如遺傳(chuan)病的產前診斷(duan)和某些(xie)遺傳(chuan)病基因攜帶者的確定,某些(xie)腫瘤的診斷(duan)和生物學劑量測定等。
二(er)、注意事項
1、固定(ding)(ding)(ding)液的(de)選擇及固定(ding)(ding)(ding)時間 石蠟(la)組織(zhi)建(jian)議用10%中性緩沖(chong)福爾(er)馬(ma)林固定(ding)(ding)(ding)6~48h,其(qi)它固定(ding)(ding)(ding)液對實驗結果(guo)可能(neng)產生一定(ding)(ding)(ding)的(de)影響。 組織(zhi)離體(ti)(ti)后應盡快固定(ding)(ding)(ding),建(jian)議在標本離體(ti)(ti)后30min內(nei)(nei)固定(ding)(ding)(ding)。如樣本固定(ding)(ding)(ding)不及時,熒(ying)光信(xin)號(hao)會(hui)減弱。 固定(ding)(ding)(ding)液的(de)體(ti)(ti)積(ji)是組織(zhi)體(ti)(ti)積(ji)的(de)4~20倍(bei),否則固定(ding)(ding)(ding)不充(chong)分,容易出現無(wu)信(xin)號(hao)或(huo)者信(xin)號(hao)很(hen)弱的(de)現象。 而(er)且,為了保證信(xin)號(hao)的(de)準確性,蠟(la)塊最好(hao)在2年內(nei)(nei)進行檢(jian)測(ce)(ce),已經切(qie)好(hao)的(de)切(qie)片在6周內(nei)(nei)檢(jian)測(ce)(ce)最佳(jia)。
2、組(zu)織切(qie)片(pian)和載(zai)玻(bo)片(pian)的(de)(de)(de)選擇(ze) 組(zu)織切(qie)片(pian)4~5μm 厚,過厚或過薄的(de)(de)(de)切(qie)片(pian)均會對信號(hao)的(de)(de)(de)強弱產生(sheng)影響(xiang),而且切(qie)片(pian)應完整,質量(liang)良好,否則會在(zai)預處理時掉片(pian)。 載(zai)玻(bo)片(pian)的(de)(de)(de)選擇(ze)建議(yi)使用防(fang)脫載(zai)玻(bo)片(pian),有條(tiao)件的(de)(de)(de)實驗室可使用更(geng)好的(de)(de)(de)陽離(li)子或者陰(yin)離(li)子專用載(zai)玻(bo)片(pian),可有效防(fang)止(zhi)脫片(pian)現(xian)象的(de)(de)(de)發生(sheng)。